一、題目：咽喉培養Throat Culture

二、原理及目的：

從咽喉採取檢體，將之培養於BAP及EMB培養基。藉此，我們可以了解化膿菌(如金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、肺炎雙球菌)和腸內菌(如克雷白氏肺炎桿菌、綠膿桿菌、大腸桿菌等)在咽喉處的帶菌情形。

如懷疑為白喉傳染時，可用Loeffler氏血清斜面培養基來培養。

本實驗對於某些疾病，如鏈球菌性咽喉痛、白喉等之診斷而言，是很重要的步驟。

三、材料及方法：

1.材料：

(1)培養基：

• • 血液瓊脂平板 (BAP , Blood agar plate)。
  • EMB瓊脂平板(Eosin methylene-blue agar)。

(2)無菌棉花棒。

2.方法：

• 以無菌的棉花棒，於咽喉部位取標本。取標本時，舌頭應下壓，注意不可碰及舌頭及嘴唇。
• 無菌操作，將標本接種於EMB瓊脂平板及血液瓊脂平板上。
• 培養基置於37℃溫箱中孵育18~24小時。

四、結果：

五、討論：

咽喉檢體的採取或立即接種，可用棉花棒，用力擦拭後咽(posterior pharynx) 。若有發炎，可採扁桃體區域、與任何的發炎潰瘍處。注意舌頭應先用壓舌板壓住，以減少口腔正常細菌之汙染。檢體若需運送，則用Aerobic CultureSwab為之。

接種檢體時宜採無菌操作，接種環在每次之間要用酒精燈燒。關於咽喉檢體的微生物檢查，主要係針對β溶血型鏈球菌，然而在某些疑似會厭炎的患者，亦應注意Haemophilus influenzae(僅能長在XV紙錠的周圍，而不能長在X及V紙錠的周圍)；因此在直接接種BAP時應穿刺幾次，則β溶血型式將更明顯。如果在BAP劃線時，貼上0.04 U bacitracin紙錠，將可直接鑑定β溶血型菌落是否為Group A 鏈球菌。

在咽喉中常見的致病菌種包括化膿菌和腸內菌，化膿菌可在BAP中培養，腸內菌則在BAP及EMB中均可培養出來：

1. 化膿菌：

• • Staphylococcus aureus(金黃色葡萄球菌)：β溶血，呈圓形、光滑、凸起、發亮、具色素。檢體接種在血液瓊脂培養基，於37℃18小時後產生典型菌落，可能無溶血作用和色素形成，經數天後，溶血作用和色素形成在室溫下較易發生。若含有其他細菌，葡萄球菌可在含有7.5﹪氯化鈉的培養基中生長。人類的葡萄球菌大多對動物無致病性。若某一種葡萄球菌能產生色素或凝固酵素，醱酵木蜜醇，液化動物膠或使血球溶解，通常即可認為是一種致病菌。
  • Streptococcus pyogenes(化膿性鏈球菌)：為A群β溶血型鏈球菌，呈黏液狀，成人才有。鏈球菌的檢體可培養於血液瓊脂，若孵養於10﹪CO₂中常可加速溶血作用。另外，含有0.04單位的枯草桿菌素小圓盤對95﹪以上A族鏈球菌具有強烈抑制作用，而A族鏈球菌正是造成咽炎(pharyngitis)的重要致病菌。
  • Streptococcus pneumoniae(肺炎雙球菌)：於血液瓊脂培養基內有α溶血(周圍有半溶血之綠色小環)，呈圓小、扁平、半透明狀，在咽喉中僅佔少量。5~10﹪CO₂可促進其生長。進一步的鑑定可用莢膜腫脹試驗，或將痰注入小白鼠腹腔內。

1. 腸內菌：

• • Klebsiella pneumoniae(克雷白氏肺炎桿菌)：α溶血，具有大莢膜，菌落大、很黏、長久培養後易混成一片。此菌能引起老年人、酒精中毒者肺支氣管炎，及慢性病患者感染肺炎、敗血症及尿道感染。肺炎桿菌第2型與第2型肺炎球菌之莢膜多醣體，可發生交互反應。
  • Pseudomonas aeruginosa(綠膿桿菌)：在血液瓊脂基中有β溶血。由於綠膿桿菌不會醱酵乳醣，可以用來作鑑別診斷。其感染常因宿主防禦系統失常所致，為院內感染的重要病原。
  • Escherichia coli(大腸桿菌)：圓形、上凸、平滑、邊緣清楚的菌落，在血液瓊脂基中有α或β溶血；在EMB鑑別培養基中呈現金屬光澤(因為EMB培養基含特殊染料和碳水化合物，對乳醣醱酵性細菌會有呈色反應)。下圖為Escherichia coli on EMB：

此外，如白喉桿菌(Corynebacterium diphtheriae)、百日咳(Bordetella pertussis)、流行性感冒嗜血桿菌(Haemophilus influenzae)、腦膜炎雙球菌(Meningococcus)、白色念珠菌(Candida albicans)等亦是重要的致病菌。

茲將呼吸道常見的感染及其原因(%)列表如下：(此表由南阿拉巴馬大學統計，有關病毒部分並無法在此次實驗中培養出來。)

上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、會厭炎，除了咽喉檢體的培養，亦有跡可循：有發燒、咽部發紅、喉嚨痛、咳嗽、聲音嘶啞、喉部有膿樣分泌物等臨床症狀。或者，由直接視檢、手術中或以組織病理檢查發現膿瘍者。至於1歲以下之嬰兒，具有發燒、體溫過低、呼吸中止、心跳徐緩、流鼻水、喉部有膿樣分泌物等臨床症狀，則為疑似患者。

六、參考文獻：

Tortora G.J.,Funke B.R.,Case C.L.（1992）.Microbiology an introduction（4 edtion）The benjamin/Cummings Publishing Company ,Inc.

丁明哲、周啟馥(民82)•醫用微生物學實驗指導•台北市：藝軒、

黃啟嘉(1991)•醫用微生物學(上冊)•台北市：合記。

蔡文城(民82)•醫師用臨床微生物學•台北市：九州圖書文物。